暗視野金相顯微鏡的基本工作原理是怎樣的呢?還有它的使用方法跟普通的光學顯微鏡又有什么不一樣呢?其保養方法是怎樣的?在使用暗視野顯微鏡的時候有哪些注意事項呢?
基本原理:暗視野金相顯微鏡的構造主要是采用一種特殊的聚光器,在聚光器的下方中央為圓形黑盤所遮,光僅由周緣進入,使光會聚于載玻片上,并斜照物體,物體經斜射照明后,發出反射光可進入物鏡,這樣,造成顯微鏡視野黑暗,而其中的物體明亮。如無暗視野顯微鏡時,只需將明視野顯微鏡上的聚光器取下,換上暗視野聚光器即可;也可在明視野顯微鏡聚光鏡頭上附一中央遮光板(黑色的X光片包裝紙,用剪刀剪成直徑小于聚光鏡直徑大約0.8-1cm,用少許鏡油輕輕粘附于聚光鏡頭上,使光源的光線能從周圍透過即可應用)。暗視野金相顯微鏡的使用方法:1) 把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。2) 選用強的光源,但又要防止直射光線進入物鏡,所以一般用顯微鏡燈照明。3) 在聚光器和標本片之間要加一滴香柏油,目的是不使照明光線于聚光鏡上面進行全反射,達不到被檢物體,而得不到暗視野照明。4) 升降集光器,將集光鏡的焦點對準被檢物體,即以圓錐光束的頂點照射被檢物。如果聚光器能水平移動并附有中心調節裝置,則應首先進行中心調節,使聚光器的光軸與顯微鏡的光軸嚴格位于一直線上。5) 選用與聚光器相應的物鏡,調節焦距,找到所需觀 察的物像。
暗視野金相顯微鏡的保養:1. 嚴格按照有關操作規則使用顯微鏡,避免因使用不當造成損毀。2. 顯微鏡在儲存和使用過程中,普遍存在著生霉起霧問題,霉和霧會使顯微鏡的視場模糊,分辯率下降。為了使顯微鏡保持良好的工作狀態,延長使用壽命,顯微鏡的工作環境應保持清潔、干燥、防塵。3. 顯微鏡在每次使用完畢后應及時做好清潔工作,特別是目鏡、物鏡等容易污染的光學部件,如發現表現表面有灰塵、指紋、臟物等,應及時用鏡頭紙清潔干凈。4. 顯微鏡工作室zui好能安裝空調、抽濕及防塵裝置。5. 如發現光學部件內部有生霉等現象,zui好及時聯系有關廠家派人清潔、維修。注意事項: A.進行暗視野觀察時,聚光鏡與載玻片之間滴加的香柏油要充滿,否則照明光線于聚光鏡上面進行全 面反射,達不到被檢物體,從而不能得到暗視野照明。 B.在進行暗視野觀察標本前,一定要進行聚光鏡的中心調節和調焦,使焦點與被檢物體一致。C.由于暗視野聚光鏡的數值孔徑都較大( NA=1.2—1.4),焦點較淺,因此,過厚被檢物體無法調在聚光鏡焦點處,一般載玻片厚度為1.0mm左右,蓋玻片厚度宜在0.16mm以下,同時載玻片、蓋玻片應很清潔,無油脂及劃痕,否則都會嚴重地擾亂zui終的像。
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