暗視野顯微鏡的原理是利用丁達爾光學(xué)效應(yīng)的原理,在普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上改造而成的。暗視野聚光器,使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑,傾斜地照射在觀察的標本上,標本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線投入物鏡內(nèi), 因而整個視野是黑暗的。而具體的原理如下:
丁達爾效應(yīng)是指當一束光線透過黑暗的房間,從垂直于入射光的方向可以觀察到空氣里出現(xiàn)的一條光亮的灰塵“通路”,這就是所謂的丁達爾效應(yīng)。而暗視野顯微鏡就是利用此原理,在普通的光學(xué)顯微鏡上換裝暗視野聚光鏡后,由于該聚光器內(nèi)部拋物面結(jié)構(gòu)的遮擋,照射在待檢物體表面的光線不能直接進入物鏡和目鏡,僅散射光能通過,因而暗視野顯微鏡視野是黑暗的。

因為暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統(tǒng),無物體時,視野暗黑不可能觀察到任何物體,而當有物體時,以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。在暗視野觀察物體,照明光大部分被折回,由于物體所在的位置結(jié)構(gòu),厚度不同,光的散射性,折光等都有很大的變化。

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