大多數顯微鏡多是基于光學顯微鏡，顯微鏡其主要就是利用光，因此光源對于其很重要，暗視野顯微鏡是利用斜射照明法阻擋透過標本細節的直射光，以反射光和衍射光來觀察標本。當然這也為其使用帶來了優勢，暗視野顯微鏡 優點有以下。

首先， 暗視野顯微鏡成像特點能夠觀察到0.004μm以上的微粒存在。而普通光學顯微鏡是看不見的微粒，但是它可以看見。但它只能看到物體的外表輪廓和運動狀態，而不能辨認其內部結構。 從結構上看，只需將普通顯微鏡更換上一個暗視場聚光器即可變為暗視場顯微鏡。

而這些顯然得益于暗視野顯微鏡應用反射光和衍射光觀察，主要應用在在觀察活細胞的結構和細胞顆粒的運動，因此特別適用于觀察原蟲、細菌的鞭毛、偽足運動，醫學檢驗學范圍適用于觀察人體體液中螺旋體、尿管形、結晶或各種粒子等。

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